1 Casus 2 Kleurstoffen in voeding Inleiding Wat is de functie: 1)Het product aantrekkelijker maken. 2)De oorspronkelijke kleur teruggeven.
2 Probleemstelling 1 Wat is het probleem met synthetische kleurstoffen? 1)Er zijn kleurstoffen zoals Sudan Red 1 die achteraf toch carcinogeen bleken te zijn. 2)Er zijn mensen die allergisch voor synthetische kleurstoffen zijn.
3 Probleemstelling 2 De analyse van verboden en toegestane kleurstoffen. 1)Direct met een coulorimeter of een UV/VIS spectrofotometer. -Nadeel, UV/VIS spectra zijn breed en weinig karakteristiek. -Probleem, mengsels van kleurstoffen, suikers, conserveermiddelen etc.
4 De oplossing Analyse met vloeistofchromatografie. (Hoge druk vloeistofchromatografie HPLC) Als kolom een apolaire –C18 kolom. De pakkingdeeltjes trekken apolaire kleurstoffen aan.
5 Handmatige analyse FDA voorschrift, -C18 kolom en water/ethanol mengsels. 1)Tartrazine/ Yellow 5 : E 102 komt van de kolom af bij 10% ethanol 2)Allura Red AC/ Red 40 : E 129 komt van de kolom af bij 20% ethanol 3)FD&C Blue 1 /Briljant Blue FCF :E 133 komt van de kolom af bij 40% ethanol
6 Chromatografische scheiding geel en blauw
7 Schema vloeistofchromatograaf
8 Oud en nieuw type HPLC
9 IJking rode kleurstoffen
10 IJklijn rode kleurstoffen
11 Winegum monster
12 Externe standaard kwantificering 1)Is de ijklijn / detector wel lineair voor Ponceau R4 2)Ja 3)Vaststelling respons R = 497 (Opp.)/9,0 (conc.)= 55,2 (Opp/conc) 4)Gegeven: Winegum monster, Opp = 211 De conc. Is dan c = 211 (Opp)/55,2 (Opp/conc)= 3,8 mg
13 Interne standaard kwantificering Interne standaard is Sunset Yellow FCF Gegeven Opp = 410 en conc = 13,37 R(interne standaard) = 410/13,37 = 30,7 De respons factor voor Ponceau 4R is nu Rf = 55,2/30,7 = 1,80 Afname intensiteit lamp in een week = 10% Opp was % = 189,9 gemeten conc = 189,9/55,2 = 3,4 mg/l ipv 3,8 mg/l R(interne standaard) = 30,7 x 0,9 = 27,6 Met de Rf factor = 189,9/X : 27,6 X = 3,8mg/l
14 Wet van Lambert-Beer E= ε.c.d ε = l/mol.cm c = mol/l d= cm Gegevens : ε= l/mol.cm,d = 1cm, c = 140g/l, Mw = 534g/mol 140/534 = 0,262 mol c = 0,262mol/l E = x 0,262 x 1 = 6812