Spectrofotometrie Interactie tussen stof en licht.

Presentatie over: "Spectrofotometrie Interactie tussen stof en licht."— Transcript van de presentatie:

1 Spectrofotometrie Interactie tussen stof en licht

2 Inleiding E = h = hc/ waarin: E = energie = frequentie = golflengte c = lichtsnelheid h = constante van Planck

3 Gebieden van het -spectrum Inleiding Vacuum UVNabije UV Zichtbaar (Vis) Nabije IR 100200400 500600 700 8001000 violet blauw groen geel oranje rood 420470530580620 (nm) E

4 Inleiding Ultra Violet (UV) 200 - 400 nm Zichtbaar (Visible - Vis) 400 - 800 nm Nabij Infra Rood (NIR) 800 - 2500 nm Infra Rood (IR) 2500 - 12500 nm

5 De

6 signaal I0I0 I cuvet Spectrofotometer lichtbronmonochromatordetector monster Blokschema van een spectrofotometer

7 Spectrofotometer UV vs. zichtbaar

8

9 Kwantitatieve analyse Wet van Lambert-Beer I0I0 I b

10 Kwantitatieve analyse Waarin: I 0 = intensiteit van de opvallende straling I = intensiteit van de doorgelaten straling  = molaire absorptiecoëfficiënt (L·mol -1 ·cm -1 ) b= weglengte (cm) c= concentratie van de absorpberende verbinding (mol/L) Wet van Lambert-Beer

11 Kwantitatieve analyse methoden Calibratiemethode Van de te bepalen verbinding wordt een serie (nauwkeurig bekende!) verdunningen gemaakt, waarvan de absorpties worden gemeten. Door gebruik te maken van interpolatie kan de concentratie van een onbekend monster na meting van de absorptie worden berekend.

12 Kwantitatieve analyse calibratiemethode Via interpolatie m.b.v. vergelijking: extinctie “onbekend monster” is bekend concentratie “onbekende” berekenen

13