Verkorte validatie van Anti-arrhythmica op de LC-MS/MS Het implementeren van een kant-en-klare LC-MS/MS Kit voor Anti-Arrhythmica onder ISO 15189 Verkorte validatie van Anti-arrhythmica op de LC-MS/MS Wouter van Rossum Klinische Farmacie & Toxicologie Leiden

Agenda Inleiding Methode Validatie Discussie Conclusie 8-mei-19

Waarom kiezen voor een kant en klare kit? Tijdswinst (i.v.m. behalen ISO 15189) Maar er zijn ook nadelen aan kant-en-klare kits. 8-mei-19

De kant-en-klare kit Chromsystems Basis kit: MassTox TDM Series A Basic Kit Parameter set: Antiarrhythmic Drugs in serum/plasma Ingedeeld in 4 groepen 8-mei-19

Antiarrhythmic drugs in serum/plasma Groep 1: Groep 3: Atenolol Mexiletine Sotalol Flecainide Propranolol Groep 2: Kinidine Groep 4: Disopyramide Amiodaron Metoprolol Desethylamiodaron Lidocaine 8-mei-19

Methode Kolom: TDM Master Colomn ? Mobiele fase A & Mobiele fase B MS-methode Voorbewerking gelijk voor alle groepen Methode variabel per groep 8-mei-19

Validatie Verkorte validatie Carry-over Lineariteit Precisie Herhaalbaarheid Reproduceerbaarheid LLQ ULQ Juistheid Stabiliteit 8-mei-19

Carry-over Blanco zonder IS Na de hoogste standaard   8-mei-19

Lineariteit Calibrator level 1 tm 3 In triplo opgewerkt en geanalyseerd 8-mei-19

Precisie Herhaalbaarheid Reproduceerbaarheid Op 1 dag, in zesvoud QC-level 1/2 De CV% voor kinidine bedraagt 4,9% bij 6 metingen met een gemiddelde concentratie van 0,73 mg/L en 4,8% bij 6 metingen met een gemiddelde concentratie van 4,94 mg/L. Reproduceerbaarheid Op 3 dagen, in zesvoud QC-level 1/2 De CV% voor kinidine bedraagt 5,5% bij 18 metingen met een gemiddelde concentratie van 0,74 mg/L en 4,1% bij 18 metingen met een gemiddelde concentratie van 4,87 mg/L.   8-mei-19

LLQ & ULQ De LLQ wordt berekend vanuit de opgewerkte ijklijnen LLQ = 3,3 * stdev/slope Gemiddelde LLQ voor kinidine is 0,30 mg/L. De laagste standaard in de ijklijn is voor kinidine rond 0,2 mg/L. ULQ - Het hoogste calibratiepunt is waarschijnlijk niet het technisch hoogst haalbare, maar wordt uit het oogpunt van deze validatie beschouwd als de bovenste bepalingsgrens. 8-mei-19

Juistheid Interne controle Hoge (6mg/L) en lage (2mg/L) concentratie Op 3 dagen in vijfvoud opgewerkt 8-mei-19

Stabiliteit Patienten materialen: Kinidine Door de fabrikant Verzendcondities: kamertemperatuur.1 Er is nog geen onderzoek gedaan naar hoelang monsters houdbaar zijn bij kamertemperatuur/ in de koelkast of in de diepvries. Dit moet nog worden uitgezocht. Door de fabrikant Interne standaard Calibratoren Controles Stabileit vials   8-mei-19

Discussie De juistheid (kinidine) voldoet niet aan de eis De standaarden + controles die werden meegeleverd in de kit waren niet juist. Mogelijke oorzaak  Hydrokinidine? De meetonzekerheid voor kinidine voldoet niet aan de eis. Veroorzaakt door de relatief hoge fout in de juistheid (circa 130% voor beide concentraties). 8-mei-19

Conclusie We hebben de fabrikant om een reactie gevraagd, deze hebben het probleem serieus opgepakt en zijn zelf onderzoek gaan doen. De voorlopige conclusie van chromsystems: de gebruikte kinidine grondstof bevatte inderdaad relatief veel hydrokinidine en dit kon onze fout bij de juistheid verklaren. Deze onzuiverheid was zowel in de grondstof als in de QC aanwezig. Chromsystems gaat met een andere, meer zuivere batch grondstof nieuwe calibtratoren en QC oplossingen maken welke binnenkort beschikbaar zijn. 8-mei-19

Vragen? Dank voor jullie aandacht! Bezoekadres Albinusdreef 2, 2333 ZA Leiden Postadres Postbus 9600, 2300 RC Leiden Centraal telefoonnummer (071) 526 91 11 Presentatie voorbeeld 8-mei-19