Ine Vansteenkiste EINDWERK “Experimenteel vergelijkende studie van kwantitatieve analysemethoden voor de bepaling van glucosamine in samengestelde preparaten”. Hogeschool West-Vlaanderen. 19 juni 2008

Overzicht Probleemstelling/doel Praktisch werk Resultaten Besluit Problemen detectie Besluit

Probleemstelling Osteoarthritis Glucosamine en Chondroïtine Voedingssupplementen: controles! Vb. Kwantificering met HPLC

Doel Hoeveelheid glucosamine/chondroïtine bepalen in preparaten. Met HPLC-methode In toekomst gebruiken in routine.

Praktisch werk Vergelijking 9 methoden HPLC-U.V. Efficiëntie, routine, kostprijs,... Met meest geschikte methode: kwantificering op preparaten.

Resultaten Methoden: opmerkingen Onmogelijk om exact op zelfde manier uit te voeren => afwijkend resultaat. Gewenst resultaat maar te ingewikkeld, duur, niet voor routine. Verder gewerkt met meest geschikte methoden.

Problemen Grootste probleem: geen scheiding van glucosamine en chondroïtine. Geen scheiding => piek niet specifiek voor 1 stof. piekoppervlakte ~ concentratie. Omzeilen via selectieve detectie.

Detectie Component niet gedetecteerd => kan niet interfereren. Aanpassen detectieparameters: enkel glucosamine of chondroïtine wordt gedetecteerd. 2 aparte methoden nodig!

Detectie U.V.- spectra: Glucosamine Chondroïtine absorptiemaxium

Detectie U.V.- spectra: absorptiemaxima dicht bij elkaar. Meten bij absorptiemaximum => interferentie. Oplossing: niet bij absorptiemaximum meten. (wel nog detecteerbaar!)

Detectie: glucosamine Derivatisatie => bij andere golflengte meten => selectiever.

Detectie: chondroïtine Oplossing: selectieve golflengte: 207 nm. (≠ absorptiemaximum) Glucosamine Chondroïtine

Kwantitatieve bepaling Twee aparte methoden Glucosamine: derivatisatie, 340 nm, acetaatbuffer/methanol. Chondroïtine: 207 nm, octanesulfonic acid/triëthylamine/fosforzuur/acetonitril => Selectieve methoden.

Kwantitatieve bepaling Referentiestandaarden => ijklijn Piekoppervlaktes ~ concentratie

Kwantitatieve bepaling Piekoppervlakte onbekende invullen in vergelijking van de ijklijn.

Kwantitatieve bepaling Monsters met glucosamine + chondroïtine + andere stoffen Ook interferentie mogelijk! Resolutie > 1.5 (farmacopee) => voldoende scheiding

Kwantitatieve bepaling Rs = 2.74 Referentiestandaard Siroop Tablet

Kwantitatieve bepaling Samengestelde preparaten (tabletten, siroop): bevatten glucosamine + chondroïtine + vulstoffen. Waarden tussen 90 en 110 % van de theoretische concentratie. Afwijking door...? => Moet nog herhaald worden!

Besluit Kwantificering glucosamine/chondroïtine in voedingssupplementen. Met meest geschikte HPLC-methode. Interferentie => selectieve detectie. 2 aparte methoden getest op monsters. Verdere validatie nodig vóór gebruik van de methoden.

Dank Chemiphar N.V. Van Daele Leen Quartier Bart Hogeschool West-Vlaanderen aanwezigen

Vragen?