Evaluatie van de Cellavision DM96 Geautomatiseerde digitale WBC-differentiatie Studente: Annelies Decq Stagementor: Apr. Biol. L. De Keersmaecker Stagebegeleider: Dhr. B. Quartier

Inhoudstafel Cellavision DM96 Testen Accuraatheid Statistiek 3 Inhoudstafel Cellavision DM96 Testen Accuraatheid Statistiek Reproduceerbaarheid Conclusie Vragen?

Cellavision DM96 Digitale WBC differentiatie 4 Cellavision DM96 Digitale WBC differentiatie Karakterisatie van het rode bloedbeeld Schatting van het aantal trombocyten  Doel evaluatie: interessante aankoop? Werking

Cellavision DM96: celsoorten 5 Cellavision DM96: celsoorten

Testen Type uitstrijkje Manueel uitstrijkje versus uitstrijktoestel 6 Type uitstrijkje Manueel uitstrijkje versus uitstrijktoestel meer smudgecellen met uitstrijktoestel

Testen (2) Verschillende buffers  minder artefacten met nieuwe buffer 7 Verschillende buffers  minder artefacten met nieuwe buffer Pediatrisch bloed = kdn < 2 jaar oud (op 5 stalen)  geen probleem voor Cellavision Beenmergstaal: goede resultaten na herclass. Normale stalen: geen bijzonderheden ontdekt  geen systematische analyse van alle stalen WBC-flaggings van Sysmex (op 20 stalen)  Verworpen aantal door Cellavision vergelijkbaar met aantal van microscoop

Accuraatheid WBC: Per celklasse regressielijnen tekenen: 8 WBC: 40 stalen in routine 20 stalen gouden standaard geteld op 120 cellen 20 stalen gouden standaard geteld op 240 cellen Per celklasse regressielijnen tekenen: - Rico = 1 - Asafsnijding b = 0 - R2 = 100%

Regressie per celklasse Accuraatheid (2) 9 Regressie per celklasse Routine op 40 stalen Gouden stand. 120 op 20 stalen Gouden stand. 240 op 20 stalen Bandneutro   y = 2,01.x + 1,88 R2= 64% y = 1,07.x + 3,38 R2= 89% y = 1,22.x + 2,38 R2= 96% Segmentneutro y = 0,98.x – 2,49 R2= 77% y= 1,11.x -13,7 R2= 91% y= 1,11.x - 12,25 R2= 94% Eosinofiel y = 0,97.x + 0,03 R2= 69% Basofiel y = 0,45.x + 0,22 R2= 8% Lymfocyt y = 0,69.x + 1,94 R2= 76% y = 1,36.x -1,26 y= 1,38.x -2,82 R2= 95% Monocyt y = 0,98.x + 1,61 R2= 46% y = 0,59.x + 1,64 R2= 54% y = 0,74.x + 0,44 R2= 56%

Accuraatheid (3) RBC: Trombocyten : Vaak slechte monolayer 10 RBC: Vaak slechte monolayer Veel aanpassingen nodig aan karakterisatie: Op 30 stalen: 15 beoordelingen aanpassen: vooral macro- en anisocytose schrappen.  Belangrijke klinische besluiten kunnen gemist worden. Trombocyten : Aantal velden tellen en met omrekenfactor naar geschatte waarde: ligt steeds dicht bij waarden geteld door Sysmex. Wel groot telwerk.

11 Statistiek Significant verschil tussen huidige microscopische methode en methode met Cellavision DM96? Gepaarde T-test Regressierekening Besluit: significant verschil tussen de twee methodes

Statistiek (2) Klinisch belang van de verschillen? 12 Celklasse Extra opmerking door Cellavision Gemiste opmerking door Cellavision Opmerking zowel microscoop als Cellavision Segment-neutrofiel Voor herclass. 1x neutropenie   Na herclass. 2x neutropenie Eosinofiel 1x eosinofilie 2x eosinofilie 3x eosinofilie Basofiel 1x basofilie Lymfocyt 3x lymfopenie 6x lymfopenie 2x lymfopenie 7x lymfopenie Monocyt 1x monocytose

Reproduceerbaarheid Uitstrijkje 10x geanalyseerd 13 Uitstrijkje 10x geanalyseerd Staal 10x uitgestreken Door microscoop, Cellavision: variatiecoëfficiënten berekenen en vergelijken met VC vooropgesteld door de firma  VC van Cellavision beter dan van microscoop en beter dan vooropgestelde VC van firma.

Conclusie Beter manuele uitstrijkjes; 14 Beter manuele uitstrijkjes; Goede resultaten verwacht voor beenmergstalen; Geen problemen met pediatrisch bloed; Goede accuraatheid voor WBC; Beter niet gebruiken voor RBC; Goede schatting van aantal trombocyten; Goede reproduceerbaarheid; Educatief interessant;  Interessante aankoop in combinatie met automatische kleurlijn.

Vragen ?

Gepaarde T-test Stellen van hypothesen: 16 Stellen van hypothesen: H0 = de twee methoden zijn gelijk Ha= de methoden zijn significant verschillend (tweezijdig) Significantieniveau alpha = 0,05 Berekeningen: T-waarde Tcrit Toets en beslissing: Tcrit overschreden? Ha aanvaarden

Regressierekening Bovengrens en ondergrens voor a bepalen 17 Bovengrens en ondergrens voor a bepalen Bovengrens en ondergrens voor b bepalen 1 in interval voor a? 0 in interval voor b? Beiden in interval? H0 aanvaarden

Regressielijn basofielen routine 18 Regressielijn basofielen routine

Regressielijn neutrofielen gouden standaard 19 Regressielijn neutrofielen gouden standaard

20 Back-up filmpje

21 Back-up filmpje (2) System control-scherm tijdens analyse

22 Back-up filmpje (3) Na eerste analyse: aanpassingen in verfication scherm

Back-up filmpje (4) 23 Verfication scherm in twee kolommen

24 Back-up filmpje (5) RBC-karakterisatie op gefotografeerde monolayer

25 Back-up filmpje (6) Schatting aantal trombocyten met omrekenfactor

26 Back-up filmpje (7) Confirmeren van de resultaten met ingeven wachtwoord Resultaten doorgestuurd naar LIS