De CMV EBV Tox rondzending Greet Boland

Een infectie met EBV, CMV of Toxoplasma gondii Wat ik wil laten zien: Een infectie met EBV, CMV of Toxoplasma gondii De CMV-, EBV- en Toxoplasma-rondzending Aviditeit Bevindingen uit de rondzendingen Nieuwe scoresysteem

EBV-infectie Epstein-Barr virus; herpes-virus Infectieuze mononucleosis (kissing disease) >95% seropositief Symptomen (meestal geen): koorts, keelpijn, adenopathie, vermoeidheid, vergrote milt, lever, hoofdpijn, heel soms meningitis of encefalitis Geassocieerd met Burkitt’s lymfoom en nasopharynx-kanker 3

EBV-infectie serologie 4

CMV-infectie Cytomegalovirus; herpes-virus +/- 50% seropositief Symptomen (meestal geen): koorts, keelpijn, adenopathie, vermoeidheid, vergrote milt, lever, spier- of gewrichtspijn NB: reactivatie na transplantatie (of primaire infectie); congenitale afwijkingen 5

Infectie met Toxoplasma gondii Parasiet / protozoa +/- 20% tot >95% seropositief Transmissie door rauw vlees, ontlasting van dieren (katten) Symptomen (meestal geen): koorts, adenopathie, spier- of gewrichtspijn, retinitis NB: reactivatie bij HIV (toxoplasmose); congenitale afwijkingen 6

CMV- en Toxoplasma serologie

De rondzending 3x per jaar Per rondzending 6 monsters Aantal deelnemers 81 (77-80 inzendingen) 4. Meestal 1 recente infectie met CMV, EBV èn Tox 5. Score op interpretatie 6. Invoeren in QBAse 8

Interpretatie Gemeenschappelijk kenmerk: adenopathie, vermoeidheid Past de serologie bij een recente infectie met ....? Past de serologie bij een doorgemaakte infectie met .....? 9

Bepalingen EBV CMV Toxoplasma VCA IgG CMV IgG Tox IgG VCA IgM CMV IgM Tox IgM EBNA IgG CMV IgG aviditeit Tox IgG aviditeit Heterofiele antistoffen overige EA IgG EA IgM 10

Bepalingen Per 2012.1 EBV CMV Toxoplasma VCA IgG n=61 CMV IgG n=72 Tox IgG n=71 VCA IgM n=69 CMV IgM n=72 Tox IgM n=70 EBNA IgG n=64 CMV IgG aviditeit n=28 Tox IgG aviditeit n=15 Heterofiele antistoffen n=7 EA IgG n=10 EA IgM n=4 Overige n=10 Per 2012.1 11

CMV- en Toxoplasma serologie IgM IgG aviditeit interpretatie - nvt Geen infectie + CMV: <0,2 (VIDAS); <50% Architect <0,4 (VIDAS, poster*) Toxoplasma: <0,2 (VIDAS) Serologie passend bij recente infectie >=0,8 (VIDAS); > 60% Architect >=0,6 (VIDAS, poster*) Toxoplasma: >=0,3 (VIDAS) Infectie langer dan 3 maanden geleden Serologie passend bij een doorgemaakte infectie Mogelijk recente infectie, vervolgonderzoek * Poster Vauloup-Fellous et al, Study of new cut-off values for the VIDAS CMV IgG avidity kit... 12

CMV-IgG aviditeit (veel grey-zone) Lazzarotto et al Lagrou et al

Toxoplasma-IgG aviditeit Iqbal et al Montoya et al

Interpretatie afhankelijk van gebruikte methoden Bij CMV en Toxoplasma: IgM +, aviditeit laag: Serologie past bij recente infectie IgM +, aviditeit grens: Interpretatie? IgM +, aviditeit hoog: Interpretatie afhankelijk van of men aviditeit meet of niet! Meet men geen aviditeit: IgM positief: serologie passend bij recente infectie 15

Gegevens uit de evaluaties 2011.2 monster B CMV IgG 2011.2 monster B Tox IgG 2011.1 monster B CMV IgG 2011.1 monster B Tox IgG 16

Gegevens uit de evaluaties Monster B 2011.2 Toxoplasma IgM (aantal deelnemers) positief grens negatief MEIA Axsym 1 14 CLIA Architect 4 ELFA Vidas 23 CLIA Liaison CLIA Immulite 5 CLIA Access 2

Gegevens uit de evaluaties Toxoplasma IgG monster C 2010.2 negatief grenswaarde positief CLIA Architect   4 1 MEIA Axsym 3 14 6 CLIA Liaison ELFA VIDAS 13 5 CLIA Access CLIA Immulite Roche Elecsys e.a. ADVIA Centaur 2 overige

EBV methoden: grote variatie D=LIAISON E=Virion/serion F=aggl Meridian G=Biotest I=agglutinatie biokit J=Panbio K=Novagnost O=Mikrogen P=Meridian EIA Q=EIA Diasorin R=Access T=EIA BioMerieux W=blot Genbio Z=aggl BioMerieux B=‘andere’ Bepaling D E F G I J K O P Q R T W Z B EBV-VCA IgG 10 6 5 1 3 12 Heterofiele antistoffen 9 8 4 7 EBV-VCA IgM 16 EBV-EA IgM 2 EBV-EA IgG EBNA IgG 14 19

CMV, toxoplasma methoden: variatie A=VIDAS C=Axsym D=LIAISON E=Architect G=Virion/serion K=Immulite M=Enzygnost O=BioMerieux P=DiaSorin Q=Access U=immunodot Genbio V=EIA Meddens B=‘andere’ Bepaling A C D E G K L M O P Q U V B CMV-IgG aviditeit 19 4 5 CMV IgM 23 12 6 10 2 1 7 CMV IgG 18 15 3 8 Toxoplasma IgM 16 9 Toxoplasma IgG aviditeit 11 Toxoplasma IgG 22 17 CMV aviditeit n=24 Toxoplasma aviditeit n=12 20

Punten gemist (2011) door: (3 rondzendingen van ca 80 deelnemers) 1. EBV: IgM gemist: 2x, VCA IgG gemist: 3x, EBNA IgG gemist 3x Wel VCA IgM maar was negatief: 12x (+7 bij CMV infectie) 4x lab goed, interpretatie verkeerd 2. CMV: IgM gemist: 2x, IgG gemist: 12x Wel IgM maar was negatief: 9x (+14x bij EBV infectie) Wel IgG maar was negatief: 2x 14x wel IgM pos, toch vult men NTB in (kost punten) Toxoplasma: Geen IgM gemist, IgG gemist: 2x Wel IgM maar was negatief: 1x Wel IgG maar was negatief: 5x 5x lab goed, verkeerd ingevuld 21

Trends in de tijd (methodegebruik): Aantal deelnemers en methode voor CMV IgG in de tijd Aantal deelnemers en methode voor Toxoplasma IgG in de tijd 22

Trends in de tijd: Aantal deelnemers en methode voor EBV Methoden VCA IgG   DiaSorin 15x Panbio 7x Novagnost 6x Biotest Virion/Serion 5x DPC 3x Biorad 1x  Meridian  1x Trinity Clindia Quickstep VIDAS 2x Wampole Merifluor 23

Lastige punten bij de opzet Moeilijk om aan geschikt materiaal te komen Recente CMV en Tox infecties zelden Opties: collega’s raadplegen, positieve controles uit kits toevoegen 85 ml per monster nodig 3. De grote diversiteit aan methoden, met name bij de EBV, maakt evaluatie lastig 4. Interpretatie afhankelijk van gebruikte methoden 24

Nieuwe score opzet ‘oud’ nieuw Past de serologie bij een recente infectie met .... Score 1 punt bij het vinden van de recente infectie; bij ‘nee’ ook een punt Score 2 punten bij het vinden van de recente infectie; een ‘nee’ wordt niet gescoord Past de serologie bij een doorgemaakte infectie met ... Score 1 punt bij elke doorgemaakte infectie Bij elk monster elke vraag Selectiever vragen en scoren

Nieuwe score opzet – voorbeeld CMV-infectie ‘oud’ nieuw Past de serologie bij een recente infectie met EBV – score 1 punt bij ‘nee’ Past de serologie bij een recente infectie met EBV – score 0 punt bij ‘nee’ Past de serologie bij een recente infectie met CMV – score 1 punt bij ‘ja’ Past de serologie bij een recente infectie met CMV – score 2 punten bij ‘ja’ Past de serologie bij een recente infectie met Toxoplasma – score 1 punt bij ‘nee’ Past de serologie bij een recente infectie met Toxoplasma – score 0 punten bij ‘nee’ Bij een doorgemaakte infectie: Score 1 punt bij elke doorgemaakte infectie

Conclusies De gebruikte methoden voor de CMV-, Toxoplasma- en met name de EBV-serologie zijn divers Hoge aviditeit sluit recente infectie grotendeels uit; grenswaarde aviditeit geeft geen uitsluitsel; interpretatie afhankelijk van al of niet meten van aviditeit Er zijn trends in de tijd waar te nemen; de methoden veranderen Gemiste punten komen door - afwijkende uitslagen - verkeerde interpretatie of verkeerd invullen in QBase

Einde Vragen?