Referentie Methoden Enzymen en Referentie waarden Gebruikersdag SKML sectie algemene chemie 22 mei 2008 Dr. Paul Franck IFCC Referentie Laboratorium HagaZiekenhuis Den Haag

10 jaar regio harmonisatie enzymen 1996: Harmonisatie Enzymen regio “Rond Vliet en Oude Rijn” (n=19) ALAT, ALFO, Amylase, ASAT, CK, GGT en LD 1998: Publicatie resultaten : “Multicenter harmonization of common enzyme results by fresh patient-pool sera.” Paul F.H. Franck, Gerard Steen, Arnold J.P.F. Lombarts, John H.M. Souverijn, and Robert K.A. van Wermeskerken. Clinical Chemistry 44:3 614-621 1998 1999: Ongeveer 50% van de Nederlandse NVKC regio’s harmoniseren volgens het model “Rond Vliet en Oude Rijn” en gebruiken dezelfde referentiewaarden.

25 jaar IFCC standaardisatie enzymen 1980: IFCC referentiemethoden voor ALAT, ASAT, CK en GGT bij 30°C. Niet voor ALFO, Amylase en LD. 1990: Onder invloed van industrie (37° snellere reactie / minder substraat / hulpenzymen) en hereniging Duitsland (25°C West en 37°C Oost) wordt gekozen voor 37°C als officiële incubatie temperatuur voor IFCC referentiemethoden. 1999: Oprichting van een wereldwijd netwerk van referentielaboratoria (n=16), waaronder HagaZiekenhuis, dat IFCC referentie methoden transformeert van 30° naar 37°C. 2002 -2008: Publicatie nieuwe IFCC referentiemethoden 37°C Clin. Chem. Lab. Med: Part 1 tm 8 2002 – 2008: (Primaire) Referentie preparaten voorzien van target / referentiewaarden

5 jaar SKML Calibratie 2000 2000: SKML wil via programma Calibratie 2000 de verschillende klinisch chemische methoden harmoniseren via “commutable” standaarden die voorzien zijn van targetwaarden afkomstig van referentiemethoden. 2003: SKML brengt secundaire enzym standaard E 2003.00114 op de markt voorzien van “gemiddelde regionale” targetwaarden. 2004: IFCC Referentielaboratoria (Milaan, Hannover en Den Haag) voorzien SKML standaard E 2003.0114 van officiële IFCC targetwaarden 2005: SKML start rondzending 2005 1 tm 4 (n=24) voorzien van IFCC targetwaarden door IFCC Referentielaboratorium van HagaZiekenhuis.

SKML rondzendingen Sera gemengd uit één laag (A) en één “gespiket” hoog (B) patiënten poolserum 24 x per jaar. Voorraad ingevroren -70°C. Controle via nationale SKML / IFCC standaardisatie. Juistheid via targetwaarden door IFCC referentiemethoden. ASAT, Amylase, ALAT, GGT, CK en LDH. ALFO nog niet. Veel laboratoria gebruiken wel IFCC methoden. Echter zij zijn nog steeds op “onjuiste” wijze geharmoniseerd. Met name LD en Amylase !

IFCC Referentie Laboratorium Den Haag

IFCC Referentie Laboratorium HagaZiekenhuis Den Haag Combi Rondzending 2008 Pool A Combi Rondzending 2008 Pool B Primaire IFCC Standaard SKML Standaard E 2003.0114

Rondzending voor Referentie Laboratoria RELA 100 90 Nummer 38 = Haga Referentie Laboratorium 270 300 330 360 U/l www.dgkl-rfb.de : zie IFCC RELA surveys

Regionale harmonisatie 1996 versus IFCC standaardisatie 2008

Evaluatie 10 jaar regionale enzym rondzendingen 6 x patiënten poolsera 2 x per jaar. Laatste tijd moeizame organisatie. Continuïteit ? Controle regio harmonisatie via consensus / regiogemiddelde. Juistheid ? Op basis van bovengrens referentiewaarden ingesteld. ASAT, ALAT, GGT, CK en LDH zijn IFCC geharmoniseerd ALFO, LD en Amylase zijn niet IFCC geharmoniseerd. Samenvattend: Controle op harmonisatie maar niet op juistheid. Continuïteit niet gewaarborgd.

Toekomst regionale enzym kwaliteit Kan de SKML enzym rondzending als vervanger van de Regio enzym rondzending dienen ? Zijn SKML enzym preparaten even goed als patiënten sera “gespiket” met humaan recombinant enzymen en dus “commutable”? Verschil Regionale harmonisatie en IFCC standaardisatie ? Hoe van Regionale harmonisatie naar IFCC standaardisatie ?

Correlatie / regressie-analyse resultaten uit IFCC Referentiemethode m.b.v. verse patiënten poolsera en SKML Combi / IFCC Enzym Rondzending m.b.v. ingevroren patiënten poolsera “gespiket” met humaan recombinant enzymen versus Regionale Referentiemethode (Beckman Coulter Synchron LX 20 HagaZiekenhuis) voor zowel verse patiënten poolsera als de SKML Combi monsters

ASAT SKML enzym rondzending 2005 1 tm 4: Sera (n=24) gemengd uit pool A en B beiden voorzien van targetwaarden IFCC referentiemethode IFCC referentie methode: 5 patiënten pool sera SKML 2005: Helling = 1,08 Intercept = -8,7 SKML 2006: Helling = 1,10 Intercept = -6,6 SKML 2007: Helling = 1,12 Intercept = -7,5 2005: Helling = 1,07 Intercept = - 8,7

ALAT 2005: Helling = 0,92 Intercept = 1,7 SKML 2005: Helling = 0,94 Intercept = 1,5 SKML 2006: Helling = 0,99 Intercept = 0,5 SKML 2007: Helling = 0,99 Intercept = 1,7

CK 2005: Helling = 1,03 Intercept = -10,4 SKML 2006: Helling = 1,02 Intercept = 0,5 SKML 2007: Helling = 1,03 Intercept = -2,8

GGT 2005: Helling = 0,75 Intercept = 10,2 SKML 2005: Helling = 0,83 Intercept = 3,8 SKML 2006: Helling = 0,86 Intercept = 2,3 SKML 2006: Helling = 0,89 Intercept = 1.7

LDH 2005: Helling = 1,79 Intercept = 15,4 SKML 2005: Helling = 1,72 Intercept = 28,7 SKML 2006: Helling = 1,78 Intercept = 31,6 SKML 2007: Helling = 1,79 Intercept = 24,5

Amylase 2005: Helling = 1,74 Intercept = 8,7 SKML 2005: Helling = 1,79 Intercept = 6,0 SKML 2006: Helling = 1.79 Intercept = -3,3 SKML 2007: Helling = 1.75 Intercept = -1,8

Conclusie SKML Combi enquête monsters zijn commutable en gedragen zich als patiënten sera in zowel IFCC- Referentiemethode als Beckman Coulter IFCC methode.

IFCC Standaardisatie Regio Den Haag en Leiden

Procedure aanpassen calibratie enzymen Neem de uitslagen van de SKML Chemie Combi enquête 2006 Voer de getallen in een Regressie programma (Passing en Bablok) X = SKML / IFCC targetwaarde Y = Individuele laboratorium waarde Beoordeel helling en intercept. Naar verwachting nagenoeg geen intercept. De gevonden helling is de correctie-factor waarmee de calibratie-factor wordt aanpast en wel door te delen. b.v. Y = aX + b = 0.92 X + 0,01 Calibratiefactor Apparaat / 0.92 of Calibratiefactor Apparaat x 1 / 0.92 = Calibratiefactor Apparaat x 1.09

Y = 1,78 X + 32 cor. factor = 0,56

Y = 0,99 X - 0,5 cor. factor = 1,01

Introductie IFCC Standaardisatie in Regio Ieder laboratorium berekend zijn correctie-factor 2005 en 2006. Reproduceerbaarheid wordt hiermee gecontroleerd Correctie factoren versturen naar P. Franck. Resultaten van Regionale Enzym Rondzending maart 2006 worden bewerkt. Resultaat presenteren in Regio vergadering van december 2007. Aanpassing per 1 juli 2008. Zelfde brief naar aanvragers versturen Argument: Internationale Standaardisatie van Enzymen.

Groen aangegeven factoren zijn voorafgaande voorbeelden van HagaZiekenhuis Leyweg

Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters

Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters

Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters

Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters

Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters

Regionale Rondzending maart 2006: 6 patiënten monsters

Conclusie SKML Combi enquête monsters zijn heel bruikbaar om de regio af te stemmen op de IFCC referentiemethode. Regio Enzym Rondzending kan hiermee vervallen.

Referentiewaarden Regio = IFCC exact

Einde

Gemiddelde = 3,92 mkat/l = 235 U/l SD = 0,155 CV = 4,0% Haga Roche 210 240 270 U/l Gemiddelde = 3,92 mkat/l = 235 U/l SD = 0,155 CV = 4,0% Hoog - Laag = 0,586 % verschil = 15,0%