V ALIDATIE VAN DE AUTOCLAAF SMI 136 X 6 M ETHODEVALIDATIE VAN DE SELECTIVITEIT VAN VITAMINE B1 EN C IN D AVITAMON J UNIOR 1-3 SIROOP Airi Cluyse

V ALIDATIE VAN DE AUTOCLAAF SMI 136 X 6 Airi Cluyse

A UTOCLAAF SMI 136 X 6 Wordt gebruikt voor: Sterilisatie: Filters Gezuiverd water Magneten Tween 80 Vernietiging van voedings- bodems waar groei op gedetecteerd is 3

V ALIDATIE AUTOCLAAF Gebruik bij elke sterilisatie: Sterilisatiekleefband Stoomindicator Validatie: Sterikon® plus bio-indicatoren => Om jaarlijkse controle van de autoclaaf toe te passen 4

V ALIDATIE AUTOCLAAF Sterikon® plus bio-indicatoren Ampullen met sporen van Geobacillus Stearothermophilus kleuromslag: paars  geel Instellingen: 20 minuten 121°C 48 uur incubatie op 60°C 5

V ALIDATIE AUTOCLAAF Sterikon® plus bio-indicatoren Resultaat: Net na autoclaveren: Niet geautoclaveerde ampul: paars geautoclaveerde ampul: paars-roze Na incubatie op 60°C: geautoclaveerde ampullen: paars-roze controle (niet geautoclaveerd): geel 6

V ALIDATIE AUTOCLAAF Conclusie: Sterikon® plus bio-indicatoren:  Methode zal jaarlijks worden toegepast als extra controle van de werking van de autoclaaf Bowie & Dick testpakketjes:  Werkt niet bij autoclaaf zonder vacuümpomp 7

M ETHODEVALIDATIE VAN DE SELECTIVITEIT VAN VITAMINE B1 EN C IN D AVITAMON J UNIOR 1-3 SIROOP Airi Cluyse

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Multivitaminesiroop Nieuw product Toediening aan kinderen van 1 tot 3 jaar (voedingssupplement) Opstellen analysemethode voor vitamine B1 en C 1 e stap: methode bepalen en instellen 2 e stap: selectiviteit bepalen 3 e stap: lineariteit bepalen 9

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 UPLC-kolom kolom: ACQUITY UPLC HSS T3 1,8 µm (2,1 x 100 mm) Kolomtemperatuur: 30°C Flow rate: 0,45 mL/min Runtijd: 17,5 min  Met deze gradiënt: overdruk (15000 psi) 10

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Wijziging: Kolomtemperatuur: 35°C Tragere overgang van ene eluens naar ander eluens ( runtijd: 21,5 min)  geen overdruk meer, pieken gescheiden 11

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Identificatie van vitamine B1 en C Vitamine B1: Vitamine C: tR (min) = 1,118 tR (min) = 0,938 12

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Bepaling van de selectiviteit Selectiviteit tov excipientia = placebo Selectiviteit tov bewaarmiddelen = placebo met bewaarmiddelen Selectiviteit tov degradatieproducten = placebo bewaard op 40°C 13

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Bepaling van de selectiviteit Selectiviteit tov eluens D 14

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Bepaling van de runtijd  Staal wordt ingezet met runtijd = 120 min 15

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Berekening afbraak vitaminen in functie van de tijd 16

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 HPLC-kolom kolom: ATLANTIS DC 18,5 µm (4,6 x 150 mm) Kolomtemperatuur: 30°C Flow rate: 1,40 mL/min Runtijd: 30 min 17

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Identificatie van vitamine B1 en C Vitamine B1: Vitamine C: tR (min) = 3,778 tR (min) = 2,274 18

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Bepaling van de selectiviteit Selectiviteit tov excipientia = placebo Selectiviteit tov bewaarmiddelen = placebo met bewaarmiddelen Selectiviteit tov degradatieproducten = placebo bewaard op 40°C 19

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Bepaling van de selectiviteit Selectiviteit tov eluens D 20

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Bepaling van de runtijd  Staal wordt ingezet met runtijd = 120 min 21

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Bepaling van de lineariteit 22

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Bepaling van de lineariteit Berekening afbraak in functie van de tijd 23

M ETHODEVALIDATIE D AVITAMON J UNIOR 1-3 Conclusie: UPLC-kolom:  Selectief voor vitamine B1 en C  Pieken niet volledig van elkaar gescheiden  Vitaminen breken zeer snel af HPLC-kolom  Selectief voor vitamine B1 en C  Pieken goed van elkaar gescheiden  Vitamine B1 stabiel, vitamine C breekt ook hier af  Uitgevoerde testen zijn 1 e stappen voor opstellen van analyseprotocol 24

V ALIDATIE VAN DE AUTOCLAAF SMI 136 X 6 M ETHODEVALIDATIE VAN DE SELECTIVITEIT VAN VITAMINE B1 EN C IN D AVITAMON J UNIOR 1-3 SIROOP Airi Cluyse