VERIFICATIE (IMPLEMENTATIE VALIDATIE) VAN EEN HPLC ANALYZER VOOR DE BEPALING VAN HBA 1C Door Sharon Vuylsteke

INHOUD  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

HEMOGLOBINE  Ingebouwd in RBC  Globine ketens + haemgroep  Transport zuurstof  400 verschillende soorten hemoglobine  HbA  HbF  HbA 2  Andere mutaties  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

HEMOGLOBINE A 1C  Geglyceerd hemoglobine, glycohemoglobine  Hoe meer glucose in bloed, hoe meer glycohemoglobine  Indruk glucose gehalte van afgelopen 6-8 weken  Maillard reactie:  Evaluatie behandeling van diabetes patiënten  Diagnose  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

DIABETES  Glucose opgenomen uit voeding => energie bron  Insuline  Glucose van bloed naar weefsels  Hormoon geproduceerd door eilandjes van Langerhans  Vrijstelling afhankelijk van glucosespiegel bloed  Diabetes door absoluut of relatief te kort aan insuline  3 types  Type 1: IADM  Type 2 NIADM  Zwangerschapsdiabetes  diagnose: nuchtere bloedglucose ≥ 126 mg/dl ad random bloedglucose > 200 mg/dl HbA1c > 48 mmol/mol ( 6,5%)  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

WERKINGSPRINCIPE  Ionuitwisselingschromatografie  SF: geladen functionele groepen  gaan bipolaire reactie aan met verschillende componenten van monster  Grotere lading = meer tegen gehouden door SF  MF: eluenten met verandering van pH en ionensterkte  Buffer A: elueert alles t.e.m HbA 1c ( HbA 1a, HbF, HbA 1c -labiel en HbA 1c -stabiel)  Buffer B: varianten S en C  Buffer C: HbA 0  Fotometrische detectie: 420 nm en 500 nm  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

WERKINGSPRINCIPE  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie Column Gel Sample Chromo-pattern Light source

VALIDATIE / VERIFICATIE  Basisvalidatie door fabrikant  Verificatie door labo zelf  Belangrijkste analytische aspecten  Testen op gekende monsters  Correlatie tussen oud en nieuw toestel  Within-run meetonzekerheid  Between-run meetonzekerheid  Juistheid  Resultaten besproken en aanvaard door kwaliteitsverantwoordelijke  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

RESULTATEN EN DISCUSSIE  Correlatie  Within-run variatie  Between-run variatie  Juistheid  Verwerkingssnelheid  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

CORRELATIE  Correlatie: 0,996  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

WITHIN-RUN VARIATIE  Telkens < 2%  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

BETWEEN-RUN VARIATIE  Telkens < 2%  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

JUISTHEID  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

VERWERKINGSSNELHEID  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

CONCLUSIE  Goed correlatie  Lage within-run en between-run variatie  Juistheid bij beide weinig afwijking  Menarini HA 8180V sneller dan Tosoh G8, maar weinig  Hemoglobine  Diabetes  Werkingsprincipe  Validatie / Verificatie  Resultaten en Discussie  Conclusie

BEDANKT VOOR JULLIE AANDACHT