Immunoglobulines immunochemie.

Presentatie over: "Immunoglobulines immunochemie."— Transcript van de presentatie:

1 Immunoglobulines immunochemie

2 Deze periode.. Immunochemie Boek biomedische kennis in het MLO
H7-8 Basis: afweer en immuniteit H immuno chemische technieken Biologie voor het MLO H 8.5 Afweerreacties

3 Afweer Binnendringen van micro-organismen
pathogenen -> infectieziekten Kolonisatieresistentie van het lichaam (eerste verdediging) Mechanische barrière Biologie barrière Chemische barrière Immuunsysteem in actie! (tweede verdediging)

4 Weerstand van imuunsysteem
Algemene weerstand Specifieke weerstand Specifieke weerstand Lichaamsvreemde stoffen virussen, bacteriën “Immuniteit” Cellulair afweer- virussen en lichaamsvreemde weefsels (T-lymfocyten) Humorale afweer- vorming antistoffen als reactie op antigenen (B-lymfocyten) Algemene weerstand alle micro-organismen Leukocyten (witte bloedcellen) Fagocytose (opeten van indringers) Neutrofiele Granulocyten en Monocyten in het bloed Macrofagen in de weefsels On lichaam bezit een

5 Humorale afweer

6 Binding antigeen-antilichaam

7 Humorale (Specifieke) afweer
Antigeen (Ag) Zorgt voor herkenning Lichaamsvreemde stof Virussen, bacteriën Antistof (Ab) immunoglobuline specifiek 1 Ab op 1 Ag Polyklonale antistoffen Monoklonale antistoffen Binding, Ag-Ab complex gemaakt door B-cellen

8 immunoglobulines Opdracht: Beantwoord de volgende vragen ..
Wat is een immunoglobuline (Ig) en hoe werkt het? Hoe zijn ze opgebouwd? (biomolecuul, Fab, Fc, lichte keten, zware keten, etc.) Welke klassen (typen) zijn er in Ig en wat is het verschil? Welk type wordt bij allergische reacties aangemaakt? En de andere types? Ig kunnen worden gezuiverd en worden gebruikt voor verschillende doeleinden/toepassingen. Welke? +/- 15 min

9 Opbouw antilichaam

10 klassen (typen) immunoglobulines

11 Immunochemische technieken
Principe: Een monoklonale antilichaam bindt met de stof (antigeen) waartegen hij gericht is. Als deze stof aanwezig is in een monster zal er een binding optreden. Bij sommige technieken wordt deze binding zichtbaar gemaakt door middel van een label Hoge concentratie – vorming neerslag en vertroebeling (Precipitatie reacties ) Lagere concentraties – samenklonteren van antigenen en cellen (agglutinatie reacties) Erg lage concentraties- labelen van antigenen vb Fluoriscerend, radioactief enzymen, luminescentie (Elisa – Enzym Linked Imunnosorbent Assay,Fluorescentie microscoop analyse)

12 agglutinatie Wat is agglutinatie? een verschijnsel wat optreedt wanneer antilichamen reageren met antigenen op het celmembraan waardoor er een binding en vervolgens een samenklontering plaatsvindt Agglutininen antilichamen (antistoffen) Agglutinogenen- antigenen

13 Agglutinatie reacties
Toepassingen Bloedgroep bepalingen Bloed transfusies Antigeen bepalingen Zwangerschap – rhesus+ baby Detectie antilichamen - ziekte beeld Identificatie bacteriën en schimmels

14 Bloed transfusies Opdracht!! Zie stencils.
Compatibiliteit agglutinatie test

15 Bloed transfusies Waarom kan je soms wel een bepaalde bloedgroep ontvangen maar niet doneren? Universele bloeddonor = ? Universele bloedontvanger= ?

16 Immunochemische technieken
Precipitatie tests Agglutinatie tests Immunoassay - ELISA

17 Immuno assay 3 belangrijke onderdelen
Binding van de te bepalen stof met een specifieke antistof (immunoglobuline) Zeer gevoelige detectiemethode Verwijdering overmaat antistof en overmaat label

18 Productie antilichamen
Polyklonale antilchamen Kan afkomstig zjn van dier of mens Mens of dier krijgt injectiemet antigeen van ziekteverwekker (immunoniseren) meerdere monoklonale antichamen met 1 specfiteit Maar zijn niet allemaal gelijk (gericht op verschillende delen van het molecuul (ziekteverwekker) Kwaliteit is niet constant – geen 1 dier of mens reageert hetzelfde Productie Monoklonale antilichamen Muis injecteren met antigeen van ziekteverwekker (immunoniseren) Cel oogsten uit de milt van een muis Fusie met Tumor cellen (snellere celdeling) vormt hybrdecel Selectie van 1 hybridecel Kloon (celkweek van 1 hybride cel) productie van onbeperkt antilichaam Oefening:

19 Productie antilichamen

20 ELISA test Enzym Linked Immuno Sorbent Assay Immunochemische test
Binding tussen antigenen en antilichamen Primaire en secundaire antilichamen Rol Enzym zorgt voor kleurreactie -> detectie Opbouw van de test kan variëren –twee typen

21 Soorten ELISA’s Indirect ELISA directe ELISA (sandwich)
Plaat: Antigeen antilichaam directe ELISA (sandwich) plaat: primaire antilichaam Antigeen Secundaire antilichaam

22 Sandwich (direct) ELISA

23 Indirect ELISA

24 Toepassingen ELISA HIV Testen Zwangerschapstesten Medicijnen
Detectie op HIV virus antigenen Zwangerschapstesten Detectie op zwangerschaps hormoon (hCG) Medicijnen Bv. residuen van dierbehandelingsmiddelen, (milieu) contaminanten, pesticiden Allergieën (allergene) eiwitten in voedselproductieketens. Bijvoorbeeld in hazelnoten. Plant pathologie Bloembollen keuringsdienst virustoetsen hCG= human chorionic gonadotropin

25 Opdracht Leg uit hoe je met een ELISA test illegaal drugs gebruik kan detecteren van ten minstens 15 verschillende drugs? Welk type ELISA test zou je gebruiken? Hoe zou je ELISA test inrichten (op de microtiterplaat)?