Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 door Kevin Hosdey

Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2  Situering  Experimenten en resultaten  Besluit Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 – Kevin Hosdey –

Situering – Inleiding & doelstelling  Regulatie van proteïnetranslatie tijdens de celcyclus Translatiecontrole op proteïnen waarvan de synthese noodzakelijk is voor meiotische maturatie Expressie en de functie van leden van het polyadenylatiecomplex Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 – Kevin Hosdey –

Situering – Xenopus laevis, een biologisch model  Grote en robuuste oocyten  micro-injectie Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 – Kevin Hosdey –

Situering – Xenopus laevis, een biologisch model Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 – Kevin Hosdey – OögeneseMeiotische maturatieEmbryogenese Herneming van meiose I Meiose II Mitose Actieve transcriptieStilstand in transcriptie ProgesteronBevruchting Stilstand in profase IStilstand in metafase II - Regulatie van specifieke proteïnen (kinases) - Translationele controle van mRNA door cytoplasmatische polyadenylatie stage VI oöcyt

Situering - Polyadenylatie  Nucleair Bevorderen van mRNA-translatie Belangrijk voor mRNA stabiliteit en transport  Cytoplasmatisch Activeren van translatie van specifieke mRNAs Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 – Kevin Hosdey –

Situering – Cytoplasmatische polyadenylatie Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 – Kevin Hosdey – CPSF CPEB CPEHEX PAP Maskin 7mG Maskin CPSF Slapend mRNA, opgeslagen in het cytoplasma stimulus 7mG AAAAAAA PABP eiF3 eiF4G polyadenylatie en translatie PAP eiF4E CPEB PABP AAAA eiF4E AAA HEX CPE Maskin CPSF PAP AAAAAA CPEB AAAAAAAAAAAAA HEX CPE P PABP 40S PRE

Experimenten en resultaten Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 – Kevin Hosdey – AAΔ7AΔ7BC In vitro translatie van XRBM9 St VIM IICytoNx α RBM α Gld2 α RPA St I/IISt IIISt VISt VSt VIM II In vitro translatie van RBM9B α RBM αTubuline

Experimenten en resultaten Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 – Kevin Hosdey – InputIgGRBM WB: α RBM WB: αCPEB RBM InputRBMGld2CPEBIgG WB: α RBM AB CPEB IP: Interactie van XRBM9 met andere leden van het cytoplasmatisch polyadenylatiecomplex

Besluit Enkel XRBM9B wordt teruggevonden tijdens de oögenese XRBM9 vormt complex met Gld2 en CPEB Rol van XRBM9 nog niet duidelijk Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 – Kevin Hosdey –

Dank u voor de aandacht Characterisation of XlRBM9 in relation with the poly(A) polymerase XlGld2 – Kevin Hosdey –