Spectrofotometrie Interactie tussen stof en licht
Inleiding E = h = hc/ waarin: E = energie = frequentie = golflengte c = lichtsnelheid h = constante van Planck
Gebieden van het -spectrum Inleiding Vacuum UVNabije UV Zichtbaar (Vis) Nabije IR violet blauw groen geel oranje rood (nm) E
Inleiding Ultra Violet (UV) nm Zichtbaar (Visible - Vis) nm Nabij Infra Rood (NIR) nm Infra Rood (IR) nm
De
signaal I0I0 I cuvet Spectrofotometer lichtbronmonochromatordetector monster Blokschema van een spectrofotometer
Spectrofotometer UV vs. zichtbaar
Kwantitatieve analyse Wet van Lambert-Beer I0I0 I b
Kwantitatieve analyse Waarin: I 0 = intensiteit van de opvallende straling I = intensiteit van de doorgelaten straling = molaire absorptiecoëfficiënt (L·mol -1 ·cm -1 ) b= weglengte (cm) c= concentratie van de absorpberende verbinding (mol/L) Wet van Lambert-Beer
Kwantitatieve analyse methoden Calibratiemethode Van de te bepalen verbinding wordt een serie (nauwkeurig bekende!) verdunningen gemaakt, waarvan de absorpties worden gemeten. Door gebruik te maken van interpolatie kan de concentratie van een onbekend monster na meting van de absorptie worden berekend.
Kwantitatieve analyse calibratiemethode Via interpolatie m.b.v. vergelijking: extinctie “onbekend monster” is bekend concentratie “onbekende” berekenen