Hoe gebeurt het kopiëren of de replicatie? DNA maakt DNA Hoe gebeurt het kopiëren of de replicatie?
Cellulaire informatiestromen Bestaat uit nucleotiden Samengesteld uit : polyester van deoxyribose en een fosfaatgroep met daarop nucleotidenbasen A,C,T of G Cellulaire informatiestromen
http://www.drm1.sgdls.nl/biologie/anwmens/startdna.htm DNA-replicatie hoe?
de verschillende benodigde enzymen
Replicatie in 1 richting : Van 3’ naar 5’ DNA-replicatie http://www.vcbio.science.ru.nl/virtuallessons/cellcycle/trans/ http://www.bioplek.org/animaties/moleculaire_genetica/dna.html Replicatie in 1 richting : Van 3’ naar 5’ 3’ vrije OH groep van C3 atoom van suikermolecuul 5’ fosfaatgroep op C5 atoom van suikermolecuul
S fase verdubbelen DNA streng mitose S fase verdubbelen DNA streng 1) waterstofbruggen verbreken tussen de beide DNA-strengen ( helicase) 2) beide strengen uitgangspunt voor replicatie (nieuw DNA helix : 1 oude + 1 nieuwe streng) = semi-conservatieve replicatie RNA-polymerase maakt een nieuw stukje RNA (= startpunt) 3’5’ DNA-polymerase verlengt stukje RNA, waterstofbruggen , controle inbouw nucleotiden + vervanging RNA Ritsen en verdubbelen
3’5’ richting aflezen, replicatie DNA= 2 tegengesteld gerichte strengen Gevolg : 1 streng groeit ononderbroken naar de replicatievork toe 3’5’ 1 streng groeit van de replicatievork af 3’5’ richting in Okazaki fragmenten DNA- ligase bindt fragmenten aan elkaar Okazaki heeft 1968 ontdekt hoe deze achterwaartse synthese verloopt http://www.youtube.com/watch?v=49fmm2WoWBs&feature=player_embedded#! http://www.youtube.com/watch?v=teV62zrm2P0 Replicatiesnelheid : 40-50 nucleotiden /sec Duizenden replicatieplaatsen tegelijk per chromosoom 3’5’ richting aflezen, replicatie
DNA vermeerderen met PCR Om massa’s van hetzelfde DNA fragment te hebben voor : forensisch onderzoek genetische onderzoek bv CF PCR-techniek Polymerase chain reaction Gebaseerd op temperatuurgevoeligheid van DNA In cycler ( buisje verhit of gekoeld) 94 º C denaturatie waterstofbruggen verbroken DNA strengen gaan uit elkaar 54 º C +2 DNA primers (20 nucleotiden lang) Hechten zich aan target + DNA-polymerase + nucleotidenbasen 72 º C nucleotidenbasen hechten zich a target DNA-strengen Proces kan vele malen verlopen zonder nieuw enzym toe te voegen dank zij hittebestendig TAQ-DNA-polymerase ( uit heetwaterbronbacterie Thermus aquaticus) DNA vermeerderen met PCR