De presentatie wordt gedownload. Even geduld aub

De presentatie wordt gedownload. Even geduld aub

Metabolisme Katabolisme HLO BML Anabolisme Nutriënten C,N,O,P,S,etc Energie Bouwstenen Macromoleculen Celstructuren +

Verwante presentaties


Presentatie over: "Metabolisme Katabolisme HLO BML Anabolisme Nutriënten C,N,O,P,S,etc Energie Bouwstenen Macromoleculen Celstructuren +"— Transcript van de presentatie:

1 Metabolisme Katabolisme HLO BML Anabolisme Nutriënten C,N,O,P,S,etc Energie Bouwstenen Macromoleculen Celstructuren +

2 Voedings-typen Energiebron –Lichtfototroof –Anorganische verbinding(en)chemolithotroof –Organische verbinding(en)chemoorganotroof C-bron –CO 2 autotroof –Organische verbindingheterotroof HLO BML

3 ATP HLO BML

4 Energie voor ATP vorming HLO BML Licht:foto fosforylatie Chemische verbinding (exogene reactie):substraat fosforylatie Protonen gradiënt (proton-motive force) / electronentransport:oxidatieve fosforylatie

5 Katabole routes HLO BML

6 Oxidatie-reductie HLO BML A ox A red e–e– reductie B red B ox e–e– oxidatie

7 Carriers HLO BML

8 Ademhalingsketen E.coli HLO BML

9 Ademhalingsketen E.coli HLO BML

10 En als er geen electron-acceptor is??? HLO BML

11 En als er geen electron-acceptor is??? HLO BML Alle NAD+ wordt omgezet naar NADH: Steeds minder NAD+ over

12 En als er geen electron-acceptor is??? HLO BML

13 En als er geen electron-acceptor is??? HLO BML Alle NAD+ is op en iedere reactie waarbij NAD+ een electron hoort op te nemen stopt: ATP synthese stopt: Cel gaat dood

14 En als er geen electron-acceptor is??? HLO BML Alle NAD+ wordt is op en iedere reactie waarbij NAD+ een electron hoort op te nemen stopt: ATP synthese stopt: Cel gaat dood Hoera ! Een oplossing ! FERMENTATIE !!!

15 Fermentatie principe HLO BML Fermentatie leidt tot regeneratie van NAD+ Hierdoor kan de glycolyse en de beperkte synthese van ATP hierin doorgaan als er geen ATP synthese mbv electronentransportketen mogelijk is

16 En als er geen electron-acceptor is??? HLO BML Fermentatie: Per glucose 2 ATP ipv 38: Dus langzamere celdeling

17 Fermentatie in het dagelijks leven HLO BML Kaas, yoghurt, augurken, worst, Spierpijn Brood, wijn, bier Zwitserse gatenkaas Precursor van acetoin: Voges- Proskauer test in API

18 Anorganische energie-bronnen HLO BML

19 Fototrofen HLO BML

20 Andere organische C-bronnen HLO BML

21 groei Snelheid van cel-toename = µ x N (Cellen/minuut)(/minuut)(aantal cellen) HLO BML N= aantal cellen µ = specifieke groeisnelheid µ max = maximale groeisnelheid (optimale condities) Bij gebalanceerde groei: gelijke toename van alle celcomponenten (cellen, gewicht, specifieke componenten)

22 Groeicurve in batch HLO BML !!

23 groeicurve HLO BML !! lnN-lnN 0 = µ (t-t 0 ) lnN= µ (t-t 0 ) +lnN 0 Y=ax + b

24 groei HLO BML

25 Batch versus continu cultuur batch HLO BML continu Medium (1x) Cellen (1x) Cellen + Medium (continu !!) Medium (continu !!) Cellen (1x) Voordeel continu-cultuur: gecontroleerde, reproduceerbare (lage) groeisnelheid mogelijk

26 Vaste Media Agar: polysaccharide uit roodwieren Gelatine: eiwit uit dierlijk materiaal Voordeel agar: Wordt niet door bacteriën afgebroken Stolt beter HLO BML

27 Medium C,N,P,S bron Suikers, eiwitten, zouten. Vitamines Thiamine (B1) biotine Spore-elementen Mn, Mo, Cu, Co, Zn. HLO BML

28 Media Complex Gistextract, vlees-extract, pepton (eiwit- hydrolysaat) Gedefinieerd medium Vogel-Bonner (zouten en sporelementen) C-bron (glucose) HLO BML

29 Media AlgemeneNutrient bouillon Verrijkings/ophopinggroeivoordeel voor het gewenste microorganisme McConkey Selectiefalleen groei van gewenste microorganisme en afsterving van ongewenste microorganismen antibiotica Identificatie/detectieherkenning van gewenste/interessante microorganisme McConkey HLO BML

30 temperatuur type minimumoptimummaximum (°C) (°C) (°C) psychrofiel Mesofiel ca 45 thermofiel ”100” HLO BML

31 pH Acidofiel<5.5Helicobacter pylori maag, urease Thiobacillus ferroxidans zwavel-oxidatie vormt H 2 SO 4 Picrophilus oshimae membraan instabiel pH>4 Neutrofiel5-8Geremd door verzurende bacteriën in voedingsmiddelen Alkalofiel>8.5Bacillus alcalophilus intern-Na+/extern-H+ uitwisseling ter “aanzuring” cytoplasma HLO BML

32 Osmose Osmotolerant (bijv. 10% NaCl) facultatief ion-import (K+) Staphylococcus sp. Halofiel (5-10% NaCl nodig) constitutieve compensatie HLO BML

33 Wateractiviteit en osmose HLO BML

34 Telkamer HLO BML Lees (opnieuw) bijlage in module BLP31 1 groot hok = 0.2*0.2*0.1 mm 3 1cm 3 = 1 ml 1mm 3 = … ?

35 Decimale verdunningsreeks HLO BML monster 1 ml verdunningsfactor verdunning ml10 ml9 ml10 ml9 ml10 ml Mengen

36 Tellen dmv uitspatelen HLO BML Monster (10 5 kve-cfu/ml) = ( kve-cfu/ml) ,1 ml Statistisch betrouwbare telling: Niet geschikt voor filamenteuze schimmels

37 Coulter counter principe HLO BML

38 Turbidometrie HLO BML

39 Massa HLO BML Drooggewicht bepaling door celpellet 8-12 uur te drogen bij ca 100 °C Met name gebruikt voor filamenteuze schimmels en voor industriële processen

40 Drooggewicht Figure : Microscopische overzichtsfoto van de biofouling(40x vergroot)

41 Drooggewicht Grafiek : Weergave van de droogperiode van Sample #11 en #12

42 Stikstof HLO BML Cellen bevatten ca 14% stikstof Analyse volgens Kjeldahl

43 Stikstof HLO BML

44 Flowcytometer (zoals FACS) HLO BML FL2FL1SSC FSC laser Forward scatter Side scatter Fluorescentie kanalen

45 Flowcytometer (zoals FACS) HLO BML Figure 2: Flow cytometry on the peripheral blood showed the plasma cells (painted red) in the monocytoid region in the forward scatter/side scatter plot. These cells expressed CD38, CD117 and cytoplasmic lambda light chain. These were negative for CD45, HLA- DR, CD20, CD19, CD56, cytoplasmic kappa, surface light chains, CD5, CD22, CD10, and CD23. Normal lymphocytes are painted green


Download ppt "Metabolisme Katabolisme HLO BML Anabolisme Nutriënten C,N,O,P,S,etc Energie Bouwstenen Macromoleculen Celstructuren +"

Verwante presentaties


Ads door Google