Kinetica Opgaven ter voorbereiding van het practicum en bespreking van het practicum.

Presentatie over: "Kinetica Opgaven ter voorbereiding van het practicum en bespreking van het practicum."— Transcript van de presentatie:

1 Kinetica Opgaven ter voorbereiding van het practicum en bespreking van het practicum

2 Opgaven ter voorbereiding van het practicum

3 Bepalen van de initiële snelheid.
met p als stoechiometrisch coëfficiënt

4 De Michaelis Menton vergelijking omzetten tot de wiskundige vorm y=ax+b
Door substitutie waarbij en

5 Bespreking van het practicum

6 Het doel en de beschrijving
Kinetica van een enzymatische reactie volgen De kinetica bepalen van een reactie Kennismaking met spectrometer

7 Reactievergelijking

8 Informatie over de spectrometer
De werking van de spectrometer

9 USB2000 Eerste spiegel Tweede spiegel Optische detector
Digitale detector Lichtbron Rooster

10 Opstelling van de proef
Computer Cuvette Spectrometer Pipet

11 Opstelling van de proef
Pipet

12 Opstelling van de proef
Computer Cuvette Spectrometer Pipet

13 Werkwijze Cuvette: 2.0mL buffer (pH=6.9)+0.5mL enzymoplossing
In spectrometer referentie + 0.5mL catechol met bepaalde concentratie Ocean Optics meting starten en opslaan 4 keer overdoen Catechol-oplossing concentratie catechol in cuvette Exp. 1 0,50 mL (0,012M) 0,002M Exp. 2 0,50 mL (0,006M) 0,001M Exp. 3 0,50 mL (0,003M) 0,0005M Exp. 4 0,50 mL (0,0015M) 0,00025M Exp. 5 0,50 mL (0,00075M) 0,000125M

14 5 grafieken van de 5 experimenten : absorbantie in functie van de tijd

15 Grafiek van de 5 functies met hun eerste 5 punten

16 1/helling in functie van 1/concentratie
Exp. Conc. Catechol snelheid (=helling) 1/conc 1/snelheid 1 0,002 0,0268 500 37,31343 2 0,001 0,0158 1000 63,29114 3 0,0005 0,0097 2000 103,0928 4 0,00025 0,0052 4000 192,3077 5 0,000125 0,0027 8000 370,3704

17 Berekeningen van en op basis van de grafieken: absorbantie in functie van de tijd
is eenvoudig af te leiden uit de grafiek is het snijpunt van de y-as kunnen we dan ook makkelijk bepalen

18 Het verband tussen absorbantie en concentratie
met Uit exp. 1: reactie die het snelst opgaat A= OD c = M (beginconcentratie in cuvette) d= 1 cm (dikte van cuvette) Dan

19 Het verband tussen absorbantie en concentratie
1.458

20 Het verband tussen absorbantie en concentratie
met Uit exp. 1: reactie die het snelst opgaat A= OD c = M (beginconcentratie in cuvette) d= 1 cm (dikte van cuvette) Dan

21 Berekeningen van en op basis van concentratie in functie van de tijd
van concentratie berekenen via de van absorbantie

22 blijft onveranderlijk

23 Samenvatting berekeningen
is de die gedefinieerd is in de chemie blijft hetzelfde

24 Conclusie Via de spectrometer kunnen we de kinetica van de enzymatische reactie volgen en zijn berekende constanten en zijn veranderlijken vergelijking van functie opstellen via Michaelis Menton vergelijking

25 1ste kan biologie