De presentatie wordt gedownload. Even geduld aub

De presentatie wordt gedownload. Even geduld aub

Parasitologisch onderzoek op faeces: nut van Giardia-antigeen bepaling CAT 24 mei 2005 Dana Van Kerkhoven.

Verwante presentaties


Presentatie over: "Parasitologisch onderzoek op faeces: nut van Giardia-antigeen bepaling CAT 24 mei 2005 Dana Van Kerkhoven."— Transcript van de presentatie:

1 Parasitologisch onderzoek op faeces: nut van Giardia-antigeen bepaling CAT 24 mei 2005 Dana Van Kerkhoven

2 Giardia lamblia Achtergrond Incidentie Transmissie Morfologie en levenscyclus Symptomen Behandeling Diagnose

3 Achtergrond 1681  ontdekking (Van Leeuwenhoek) 1859  eerste casus Giardiasis (Lambl) Protozoa Giardia muris: knaagdieren, vogels, reptielen Giardia agilis: amfibiën Giardia lamblia: zoogdieren, mens

4 Incidentie Industrielanden: 2-5% Ontwikkelingslanden: 20-30% 15-30% (< 10 jaar) < 5 jaar of jaar Late zomer of herfst

5 Transmissie Orale ingestie van cysten:  via besmet water  via besmet voedsel  faeco-orale overdracht Risicogroepen: reizigers, immuungecompromitteerden, homoseksuelen, kinderdagverblijf, instelling

6

7 Morfologie

8 Pathogenese NIET INVASIEF! Disruptie brush-border enterocyten (Mucosale inflammatie) Enterotoxines Stimulatie van inflammatoire reactie

9 Symptomen (1) 1.Asymptomatische cystepassage 2.Acute zelflimiterende diarree 3.Chronische diarree met malabsorptie en gewichtsverlies  incubatieperiode: 1-2 weken

10 Symptomen (2) Giardiasis symptomenPercentageRange Diarree Malaise Flatulentie Slechtruikende stoelgang Abdominale krampen Opgezet gevoel Misselijkheid Anorexia Gewichtsverlies Nausea Koorts Urticaria Constipatie

11 Symptomen (3) ACUUT: Diarree Abdominale krampen Opgeblazen gevoel en flatulentie Stoelgang: waterig, overvloedig

12 Symptomen (4) CHRONISCH: Diarree-constipatie-normaal Stoelgang: vettig, slechtruikend, bleek Malaise, hoofdpijn Diffuse abdominale en epigastrische ongemakken Gewichtsverlies Zz: arthritis, urticaria, galwegen, gastritis

13 Behandeling (1) ALTIJD behandelen!  subklinische malabsorptie  transmissie stoppen!!! Keuzepreparaat: tinidazole (> 90%) Herval diarree: 1. Herinfectie 2. Resistentie 3. Lactose-intolerantie  follow-up

14 GeneesmiddelDosis volwassenenDosis kinderen metronidazole250mg (3x/D) 5-7D5mg/kg (3x/D) 7D quinacrine100mg (3x/D) 5-7D2mg/kg (3x/D) 7D nitazoxanide/100mg (2x/D) 3D (12-47 maanden) 200mg (2x/D) 3D (4-44 jaar) furazolidone100mg (4x/D) 7-10D6mg/kg (4x/D) 10D albendazole400mg 5D22,5mg/kg (1x/D) 5-7D (max 400mg) paromomycine10mg/kg (3x/D) 7D30mg (1x/D) 5-10D tinidazoleÉénmalig 2g50mg/kg (éénmalig) max 2g

15 Diagnose 1. Klinische inlichtingen 2. Microscopie faeces 3. Microscopie dundarmspecimens 4. Serologie 5. Moleculaire technieken 6. Antigeentesten

16 Klinische info Etiologische kiem: niet voorspelbaar! Verdacht!:  hoogrisicogroepen  chronische, persisterende diarree + malabsorptie + gewichtsverlies

17 Microscopie op faeces (1) Direct onderzoek op verse stoelgang Onderzoek na concentratie Permanent gekleurd uitstrijkje

18 Microscopie op faeces (2) Problemen: 1) interfererende substanties: antibiotica, barium, diarreemedicatie, … 2) direct onderzoek binnen 30’ 3) vereist ervaring onderzoeker 4) intermittente excretie

19 Microscopie op feces (3) Door intermittente excretie: - sensitiviteit op één staal: 50-80% - sensitiviteit > 90%:  3 stalen (Burke, Hiatt)  CDC: min. 3 stalen Richtlijnen BCHealthServices, Kabani, Isaac- Renton

20 Microscopie op feces (4) Oplossingen: 1) Drie of meer stalen of poolen 2)Microscopie op dundarmspecimens 3)Antigeentesten

21 Diagnose 1. Kinische inlichtingen 2. Microscopie op feces 3. Microscopie dundarmspecimens (Goka, 1990) 4. Serologie 5. Kweek 6. Moleculaire technieken 7. Antigeentesten

22 Antigeentesten (1) Antigeendetectie: - immunofluorescentie - enzyme-linked immuno­sorbent assays - niet-enzymatische immunoassays (o.m. sneltesten) Positief resultaat: - actieve infectie - dragerschap of chronische, inactieve infectie

23 Antigeentesten (2)

24 Antigeentesten (3) Methode Antigeen­ detectie Commerciële testFirma/verdelerOrganisme IF (DFA)MerifluorMeridianGiardia & Cryptosporidium ELISAProSpecT Giardia Microplate Assay RemelGiardia Sneltesten (IA) TriageBioSiteGiardia & Cryptosporidium & Entamoeba ProSpecT Giardia Rapid Assay RemelGiardia Sneltesten (Immuno- chromato- grafie) ColorPACBecton DickinsonGiardia & Cryptosporidium ImmunoCard STATMeridianGiardia & Cryptosporidium Giardia-stripCorisBioconceptGiardia

25 Giardia-strip (Coris) (1)

26 Giardia-strip (Coris) (2)

27 Huidige situatie (1) BeschrijvingAantal Analyse ‘parasieten in feces’1715 Positieve analyses93 (5,7%) Negatieve analyses1622 Patiënten met een positief staal59 Positieve stalen82 Giardia lamblia20 (21,5 % van de positieve analyses) (1,2% van de uitgevoerde analyses)

28 Huidige situatie (2)

29 Huidige situatie (3) Aantal aangevraagde stalen per patiënt Aantal patiënten Aantal positieve stalen //// 21578/// 36/15// 43/111/ 53//12/

30 Huidige situatie (4) Aantal aangevraagde stalen per patiënt Aantal patiënten

31 Situatie jaarAant. Pat.(Unieke pat.) (1673) (1686) (1395) (1378) (1320) (455)

32 Situatie Voor 2004: Raadpl. Kindergen.183 Eenh. Kindergen.205 Maag-darm103 Spoed135 Raadpl. Interne464 HartTX 37, TX 75, pneumo 42

33 Situatie elders PlaatsZiekenhuisMicroscopieAntigeentesten Opleidingscentra GSO/ASO GenkZiekenhuis Oost-Limburg +ColorPac (BD) HasseltVirgaJesse Ziekenhuis +Crypto-strip (CorisBioconcept) ProSpecT Giardia Microplate assay (Remel) BruggeA.Z. St. Jan+Crypto/Giardia CEL (Cellabs) Breda+Evaluatie PCR voor screening op Giardia en Entamoeba Goes+Merifluor (Meridian) AntwerpenTropisch instituut ProSpecT (Remel) Giardia/Crypto/E. histolytica

34 Technische performantie Patiëntvariabelen Staalselectie Staalstabiliteit Reproduceerbaarheid, correlatie en accuraatheid, meetbereik, interferenties Turn around time (TAT)

35 Staalselectie (1) AntigeentestVers/ vers bevroren Geconcen -treerd Preservatieven formalineSAFPVA DFA Merifluor (Meridian)++*++/ EIA ProSpecT Giardia Microplate Assay (Remel) +/++/ Sneltesten Giardia strip (Coris Bioconcept) Crypto strip (Coris Bioconcept) ++++ //// //// //// //// ColorPAC (Becton Dickinson)+/++/ Triage (BioSite)+//// ImmunoCard STAT (Meridian)+/++/ ProSpecT Giardia Rapid Test kit (Remel) +/++/ ProSpecT Crypto Rapid Test kit (Remel) +/++/

36 Staalselectie (2) Rosoff, 1989: onderzocht compatibiliteit van een immunoassay (ProSpecT Giardia, Remel) met de meest frequent gebruikte fixativa (10% formaline, SAF) en een transportmedium (Cary-Blair)  geen significante verschil Fedorko, 2003: testte positieve en negatieve stalen met drie commerciële IA en twee DFA op formaline- en Ecofix-gefixeerde stalen  goed resultaat bij DFA en IA van Remel

37 Staalstabiliteit Max. 24 uur op 4°C Langdurig bewaren: - formaline en SAF (6 maanden) - bevriezen (12 maanden) ! antigenen niet stabiel in 10% formaline (Addiss, 1991)

38 Reproduceerbaarheid Gegevens fabrikant Giardia-strip: Intra-assay: 100% Inter-assay: 100%

39 Correlatie en accuraatheid Giardia- strip Sensiti- viteit (%) Specifi- citeit (%) Accuraat­ heid (%) NPW (%) PPW (%) Totaal aantal stalen (aantal positieve stalen) Refere ntieme- thode Studie 1 fabrikant 91,693,592,995,588,070 (24)Micro- scopie & EIA Studie 2 fabrikant FASE 1 77,885,780,060,093,325 (18)Micro- scopie Studie 2 fabrikant FASE 2 73,7100,079,250,0100,024 (19)EIA Eigen studie 93,896,995,896,993,848 (16)Micro- scopie

40 Wanneer is een antigentest positief? Merifluor: fluorescerende cysten ProSpecT (Remel): OD > 0.04 (Addiss) Sneltesten: kleurstreep

41 Interferenties Valspositieven door bloed (Katanik, 2001) Literatuur en eigen evaluatie: geen interferenties bij de antigeentesten  Rosoff: Ascaris lumbricoïdes en Entamoeba coli Fabrikant: interferentie Giardia-strip en Staphylococcus aureus (10 8 tot 10 9 CFU/ml)

42 TAT Merifluor en ProSpecT: - minder manueel werk - in batch  geen verbetering TAT t.o.v. microscopie Sneltesten: TAT: minuten

43 Klinische performantie Sensitiviteit en specificiteit in de literatuur Number needed to diagnose (NND)

44 Sensitiviteit-Specificiteit (1) Microscopie als ‘gouden standaard’  Positieve antigeentest: valspositief of echt positief  Moeilijke vergelijkbaarheid tussen de verschillende publicaties

45 Sensitiviteit-Specificiteit (2) TestMethodiekSensitiviteit (%)Specificiteit (%) MerifluorDFA99,2-100,099,8-100,0 ProSpecT Giardia Microplate Assay ELISA91,0-100,098,0-100,0 Giardia-stripSneltest100,098,9 Color PAC96,0-100,095,1-100,0 Triage83,3-100,097,4-100,0 ImmunoCard STAT81,3-93,599,5-100,0 ProSpecT Giardia Rapid Assay 87,2-95,0100,0

46 NND Microscopie: drie stalen Antigeentesten: - Mank 1997: één staal (80% ↔ 92.7, 87.3%) - Hanson 2001: twee stalen bij een hoge prevalentie van Giardiasis

47 Impact Diagnostisch Behandeling Prognose Organizationeel (in het ziekenhuis)

48 Diagnostische impact: meerwaarde antigeentest? PRO: - minder MLT-uren (minder vereiste stalen en minder manueel werk) - minder vereiste ervaring - hoge sensitiviteit en specificiteit (op één staal) - verkorte TAT CONTRA: - kostprijs - niet ALLE parasieten

49 Diagnostische impact: indicaties klinisch zeer sterk verdenking van Giardiasis vervangen van invasieve diagnostiek voor de cryptische casussen outbreaks (via besmet water of voedsel) screening naar dragers en epidemiologisch onderzoek follow-up

50 Guidelines

51 Kosteneffectiviteit Actuele kost Nomenclatuur Impact op financiën elders

52 Actuele kost Kost microscopie: Reagentia en ‘consumables’:€ 0,14 Werkvloer + logistiek:€ 4,99 Totaal:€ 8,06 Totaal bij drie onderzoeken:€ 24,18 Opsporen Cryptosporidium € 8,40 (additioneel)

53 Kost antigeentesten TestFirmaPrijs per test (€) MerifluorMeridian5,77 * ProSpecT Giardia Microplate Assay Remel4,77 * ProSpecT Giardia Rapid Assay Remel11,35 * TriageBioSite19,6 Giardia-stripCorisBioConcept5,4 ** Color PACBecton Dickinson13,2 ImmunoCard STATMeridian13,11 * Literatuurgegevens (gegevens van eind jaren ’90 – begin 2000) ** Crypto-strip (CorisBioConcept): € 2,87 per test

54 Nomenclatuur Nummer en ‘Opzoeken van parasieten, na verrijking, in feces (Maximum 1) Klasse 16’  B400 (ambulant/ gehospitaliseerd) ! Afzonderlijke nomenclatuurregel voor Cryptosporidium

55 Financiële impact elders Hoge specificiteit, onderzoek op één staal en verkorte TAT  stopzetten verdere diagnostiek!  verminderen hospitalisaties!

56 Opmerkingen en to do’s (1) 1)Negatief  geen eieren/cysten gevonden 2)Max. 48 uur op 4°C  preservatieven (onderwerp nieuwe CAT)

57 Opmerkingen en to do’s (2) 3) Belang pre-analytische fase (CAT Kristien): - ‘ parasieten opzoeken in faeces’ (chronische diarree) - Hospitalisatie sedert … Antibiotica sedert …

58 Over- of onderconsumptie 18 aanvragen: Antibiotica: 9/18 Hospitalisatie: 7/18 Hospitalisatie en AB: 3/18 Parasieten + Clostridium + Kweek: 9/18

59 Besluit Is er plaats voor antigeentesten in UZ Gasthuisberg? Is er interesse vanuit de kliniek? Wat met de Giardia-strip? ?


Download ppt "Parasitologisch onderzoek op faeces: nut van Giardia-antigeen bepaling CAT 24 mei 2005 Dana Van Kerkhoven."

Verwante presentaties


Ads door Google