Aortarupturen bij het Friese paard: Focus op morfologie van gladde spiercellen en collageenvezels in de tunica media van de aortawand via immunohistochemische.

Presentatie over: "Aortarupturen bij het Friese paard: Focus op morfologie van gladde spiercellen en collageenvezels in de tunica media van de aortawand via immunohistochemische."— Transcript van de presentatie:

1 Aortarupturen bij het Friese paard: Focus op morfologie van gladde spiercellen en collageenvezels in de tunica media van de aortawand via immunohistochemische en histologische kleuringen Naam: Chana Callens Stagebegeleider: Kaat Van Oostveldt Stagementor: Catherine Delesalle en Margreet Ploeg Stageplaats: Universiteit Utrecht, faculteit Diergeneeskunde

2 Inhoud Inleiding Aortarupturen bij het paard
Immunohistochemische kleuringen Histologische kleuringen Discussie

3 Inleiding Het Friese paard
* 13e eeuw * Inlands paardenras van Nederland * Nauwe stamboom Friese paard In Nederland zijn er ongeveer Friese paarden, In België zijn er 500 tot Friese paarden aanwezig Warmbloed paard

4 Inleiding Onderzoek * Pathologie aortarupturen bij het Friese paard achterhalen * 38 onderzochte paarden: - 20 aangetaste Friese paarden - 9 niet aangetaste Friese paarden - 9 warmbloedpaarden * Immunohistochemische kleuringen = gladde spiercellen * Histologische kleuringen = collageen * Microscopische beoordeling 4 gradaties

5 Inleiding Aorta * Grote lichaamslagader * 3 lagen = - Tunica intima - Tunica media - Tunica adventitia De aorta Opbouw aortawand

6 Inhoud Aortarupturen bij het paard Inleiding
Immunohistochemische kleuringen Histologische kleuringen Discussie

7 Aortarupturen bij het paard
* Warmbloedpaarden = connectieplaats * Friese paarden = 1) Acute vorm 2) Semistabiele vorm 3) Stabiele vorm Fries paard Warmbloed paarden

8 Aortarupturen bij het Friese paard – Acute vorm
Aortaruptuur Aorta

9 Aortarupturen bij het Friese paard – Semistabiele vorm
Cuffing / Mouw rondom aorta Aorta

10 Aortarupturen bij het Friese paard – Stabiele vorm
Scheur in arteria pulmonalis Aorta-pulmonale fistel

11 Inhoud Immunohistochemische kleuringen Inleiding
Aortarupturen bij het paard Immunohistochemische kleuringen Histologische kleuringen Discussie

12 Immunohistochemische kleuringen
ABC/PO Method for Mouse anti SMA (Smooth Muscle Actin) * Indirecte ABC/PO - methode * Aankleuren gladde spiercellen * Scoren oriëntatie gladde spiercellen Het ABC/PO complex bestaat uit een aaneenschakeling van avidinemoleculen, biotinemoleculen en het horseradisch peroxidase enzym. Avidine vertoont ook een affiniteit voor het biotine gelabeld secundair antilichaam en zal hiermee ook een binding aangaan. Binding van het complex is echter niet microscopisch zichtbaar, waardoor in een volgende stap nog een substraat wordt toegevoegd

13 Immunohistochemische kleuringen
Resultaten Smooth Muscle Actin Staining Aangetaste Fries 1 - Normaal beeld van de gladde spiercellen in de tunica media van de aortawand (200x vergroting) Normaal beeld van de gladde spiercellen in de tunica media van de aortawand

14 Immunohistochemische kleuringen
Resultaten Smooth Muscle Actin Staining Aangetaste Fries 2 - Lichte afwijking van de gladde spiercellen in de tunica media van de aortawand (200x) Lichte afwijking van de gladde spiercellen in de tunica media van de aortawand

15 Inhoud Histologische kleuringen Inleiding Aortarupturen bij het paard
Immunohistochemische kleuringen Histologische kleuringen Discussie

16 Histologische kleuringen
Von Gieson voor collageen en spierweefsel * Belangrijkste stappen in het protocol - Weigert’s Haematoxyline - Blauwen in stromend water - Von Gieson oplossing * Aankleuren collageenvezels * Scoren hoeveelheid collageen

17 Histologische kleuringen
Resultaten Von Gieson voor collageen en spierweefsel Warmbloed 1 - Normaal beeld van de collageenvezels in de tunica media van de aortawand (200x) Normaal beeld van de collageenvezels in de tunica media van de aortawand

18 Histologische kleuringen
Resultaten Von Gieson voor collageen en spierweefsel Oude Fries 3 -Lichte toename van de collageenvezels in de tunica media van de aortawand (200x) Lichte toename van de collageenvezels in de tunica media van de aortawand

19 Histologische kleuringen
Resultaten Von Gieson voor collageen en spierweefsel Aangetaste Fries 13 - Toename van de collageenvezels in de tunica media van de aortawand (100x) Toename van de collageenvezels in de tunica media van de aortawand

20 Inhoud Discussie Inleiding Aortarupturen bij het paard
Immunohistochemische kleuringen Histologische kleuringen Discussie

21 Discussie ABC/PO Method for Mouse anti SMA (Smooth Muscle Actin)
* Aangetaste Friese paarden (20) paarden = factor 0 5 paarden = factor 1 of 2 * Controle Friese paarden (9) paarden = factor 0 * Warmbloeden (9) paarden = factor 0 1 paard = factor 1 Besluit * Pathologie aortaruptuur = waarschijnlijk niet te verklaren door de geringe afwijkingen in oriëntatie van gladde spiercellen

22 Discussie Von Gieson voor collageen en spierweefsel
* Aangetaste Friese paarden (20) paarden = factor 0 9 paarden = factor 1 of 2 * Controle Friese paarden (9) paarden = factor 0 5 paarden = factor 1 of 2 * Warmbloeden (9) paarden = factor 0 1 paard = factor 1 Besluit * Pathologie aortaruptuur = waarschijnlijk te verklaren door toename in hoeveelheid collageen in tunica media

23 Discussie Toekomstperspectief * Elastine Universiteit Gent
* Collageen Universiteit Utrecht - Collageen I en III = op punt - Collageen V = volop onderzoek

24 Aortarupturen bij het Friese paard: Focus op morfologie van gladde spiercellen en collageenvezels in de tunica media van de aortawand via immunohistochemische en histologische kleuringen Naam: Chana Callens Stagebegeleider: Kaat Van Oostveldt Stagementor: Catherine Delesalle en Margreet Ploeg Stageplaats: Universiteit Utrecht, faculteit Diergeneeskunde